一、仪器简介

Hyperion组织成像质谱流式系统由Helios质谱流式系统和Hyperion成像模块共同组成，可以对单细胞悬液样本和组织切片样本进行多参数蛋白检测。质谱流式系统利用稀土元素作为抗体的标签，以质谱作为检测手段，可在单细胞水平同时分析40多种细胞表面和胞内标志物。质谱流式系统检测的是金属元素信号，不同的金属元素几乎没有信号重叠，且检测背景信号极低，可以解决传统流式的荧光串色的问题，故质谱流式样本制备过程时不需要单染管，不用调补偿，真正的单管实验，节省宝贵的研究样本，单个样本收集百万个细胞，帮助您发现意想不到的亚群和独特的细胞功能。

二、检测原理

细胞检测前需要标记上金属标签的抗体，染色流程与传统流式相似，先染表面marker，破膜打孔后再染胞内marker，最后标记细胞核。

标记好金属标签抗体的单细胞悬液由气动上样器送入样本管中，经雾化器雾化成单细胞液滴，单细胞在等离子体中进行离子化，离子化后的细胞形成离子云，离子云中有许多细胞内源性的元素，需要通过四极杆过滤器筛选离子，从四极杆出来的离子几乎是标记细胞的金属离子，这些离子进入到飞行时间质谱检测室进行飞行时间质谱，检测器会根据每种金属元素的质荷比识别出每种金属元素并统计其丰度，最终生成FCS文件，可用相应软件进行分析，如Cytobank和FlowJo等。

三、功能特色

1. 多参数蛋白分析：同时标记40多种蛋白参数，深入分析细胞的亚群和功能。

2. 支持多种标志物的检测：可同时检测细胞表面标志物和胞内的标志物，如细胞因子，转录因子，磷酸化蛋白和修饰蛋白等。

3. 节省样本：真正的单管实验，不需要单染管，仅需1管样本可同时检测40多种标志物，用少量的样本挖掘出更多有用的信息。

4. 方案设计简单：质谱流式具有通道多，低背景和无串色的技术特点，易于方案设计，无需专人帮助设计，方案调整时不需要对其他通道进行再次验证，缩短实验周期。

5. 结果可靠具有重现性：采用质谱的原理检测，通道间相互影响小，检测的背景值低，不会受到细胞自发荧光的影响，信号更准确。下机数据不需要调补偿，避免了人为因素影响，使结果更真实可靠并具有重现性。

6. 染色后的细胞可冻存：由于金属标签抗体非常稳定，故染色后的细胞不会因冻存而影响信号，适用于多中心和纵向研究。

7. 支持成像模式：对组织切片样本进行成像，获得组织空间原位信息。

四、技术参数

1. 系统具有135个检测通道，质量范围75-209 amu。

2. 样本类型：单细胞悬液（血液、骨髓和实体组织单细胞悬液样本）。

3. 金属标签种类丰富：抗体标记（>42种），死细胞标记和DNA标记等。

4. 可与组合标记技术相结合，支持不少于20个样本混合制备和检测，减少操作误差，提高检测通量。

5. 仪器自动进行日常质控，保证采集数据的准确性。

6. 采集样本中加入内参，校正信号的漂移，使不同批次和不同仪器采集的数据具有可比性。

7. 软件采集数据时，可实时观察各个通道的信号信息。

8. 采集数据以通用流式文件FCS格式输出。

9. 软件集成文件合并，标准化，随机化等功能, 可以进行数据拆分,文件数据格式转换等操作。

五、应用范围

质谱流式系统在节约样本的前提下，实现单细胞水平40多个参数的分析，在生物学研究方面具有不可替代的用途，广泛应用于以下领域的研究:

(1)生物标志物的筛选；（2）药物开发和药效评估；（3）肿瘤治疗效果评估；（4）组织微环境分析：肿瘤的免疫微环境；（5）炎症信号通路研究：探索分子机制；（6）肿瘤分型研究；（7）细胞凋亡及凋亡信号传导；（8）细胞的分化和发育：干细胞的鉴定及分化发育的机制。