医学科技创新中心科研培训系列讲座20250080期——组织成像质谱流式系统培训
日期: 2025-11-07   来源:    浏览量:

一、设备简介

Hyperion组织成像质谱流式系统由Hyperion组织成像模块和Helios质谱流式系共同组成,可以对单细胞悬液样本和组织切片样本进行多参数蛋白检测。组织成像质谱流式系统利用稀土元素作为抗体的标签,通过紫外激光剥蚀切片样本,送入到Helios检测系统中,可在单张切片样本上同时检测40多种标志物。组织成像质谱流式系统检测的是金属元素信号,不同的金属元素信号重叠小,背景值极低,且不受组织自发荧光的影响,故组织成像质谱流式系统以高质量数据帮助您详细解析复杂的组织微环境,分析组织中的细胞亚群和其功能,并保留组织原位空间信息。

二、检测原理

细胞检测前需要标记上金属标签的抗体,染色流程与传统流式相似,先染表面marker,破膜打孔后再染胞内marker,最后标记细胞核。标记好金属标签抗体的单细胞悬液由气动上样器送入样本管中,经雾化器雾化成单细胞液滴,单细胞在等离子体中进行离子化,离子化后的细胞形成离子云,离子云中有许多细胞内源性的元素,需要通过四极杆过滤器筛选离子,从四极杆出来的离子几乎是标记细胞的金属离子,这些离子进入到飞行时间质谱检测室进行飞行时间质谱,检测器会根据每种金属元素的质荷比识别出每种金属元素并统计其丰度,最终生成FCS文件,可用相应软件进行分析,如Cytobank和FlowJo等。

单细胞检测原理

标记好金属标签抗体的组织切片,通过紫外激光剥蚀样本,激光点打到组织上形成plume,plume经coupling tube送入到Helios检测系统中,plume在等离子体中进行离子化,离子化后的plume形成离子云,离子云中有许多细胞内源性的元素,需要通过四极杆过滤器筛选离子,从四极杆出来的离子几乎是组织上标记的金属离子,这些离子进入到飞行时间质谱检测室进行飞行时间质谱,检测器会根据每种金属元素的质荷比识别出每种金属元素并统计其丰度,最终将不同像素点的信息整合生成高维的图像信息,图像数据可用相应软件进行分析,如Cellprofiler和histoCAT等。

组织成像检测原理

三、功能特点

1. 多参数蛋白分析:同时标记40多种蛋白参数,深入分析细胞的亚群和功能。

2. 支持多种标志物的检测:可同时检测细胞表面标志物和胞内的标志物,如细胞因子,转录因子,磷酸化蛋白和修饰蛋白等。

3. 节省样本:真正的单管实验,不需要单染管,仅需1管样本可同时检测40多种标志物,用少量的样本挖掘出更多有用的信息。

4. 方案设计简单:质谱流式具有通道多,低背景和无串色的技术特点,易于方案设计,无需专人帮助设计,方案调整时不需要对其他通道进行再次验证,缩短实验周期。

5. 结果可靠具有重现性:采用质谱的原理检测,通道间相互影响小,检测的背景值低,不会受到细胞自发荧光的影响,信号更准确。下机数据不需要调补偿,避免了人为因素影响,使结果更真实可靠并具有重现性。

6. 染色后的细胞可冻存:由于金属标签抗体非常稳定,故染色后的细胞不会因冻存而影响信号,适用于多中心和纵向研究。

7. 兼容多种切片类型检测:FFPE切片,冰冻切片和细胞涂片等。

8. 支持成像模式:对组织切片样本进行成像,获得组织空间原位信息。

9. 染色后的切片可长期保存:由于金属标签抗体非常稳定,故染色后的切片无需立即采集,可长期保存,适用于多中心和纵向研究。

四、应用范围

组织成像质谱流式系以单细胞分辨率,在单张切片上实现40多个参数的分析,在生物学研究方面具有不可替代的用途,广泛应用于以下领域的研究:(1)生物标志物的筛选;(2)药物开发和药效评估;(3)肿瘤治疗效果评估;(4)组织微环境分析:肿瘤的免疫微环境;(5)炎症信号通路研究:探索分子机制;(6)肿瘤分型研究。

五、培训内容及日程安排

培训内容:理论讲解

日程安排:

2025/11/11上午(9:00~12:00):基础理论+应用

地点:科创中心南区H204

主讲人:牛 惠 思百拓资深应用专家

联系人:孙老师 17632080913

报名链接:https://lab.sdfmu.edu.cn/client/offlinetraining/detail/455

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